产品类别 | 产品名称 | 项目简称 | 货号 | 规格 |
猪 |
通用名称:猪瘟病毒抗体检测试剂盒 英文名称:Diagnostic Kit for Classical Swine Fever Virus Antibody(Chemiluminescent Micropartical Immunoassay) 汉语拼音:Zhuwen Bingdu Yi’er Kangti Jiance Shijihe (Ciweili Huaxue Faguangfa)
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CSFV-Ab |
KMC20212 |
100测试×2 100测试×5 |
预期用途
用于检测猪血清、血浆中的猪瘟病毒中和抗体。
概述
猪瘟是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种急性、发热、接触性传染病,具有高度传染性和致死性。本病在自然条件下只感染猪,不同年龄、性别、品种的猪和野猪都易感,一年四季均可发生;在我国大部分省都有发生,常给养猪业造成毁灭性损失。
预防猪瘟最有效的方法是接种猪瘟疫苗。猪瘟病毒抗体检测,可以反映疫苗免疫之后的抗体水平,有利于观察免疫效果,指导强化免疫时机。
本产品使用磁微粒包被猪瘟病毒1.1/2.1亚型病毒样颗粒,应用间接法原理,结合高灵敏度的化学发光技术,可有效检出猪血清、血浆中的猪瘟病毒1.1/2.1亚型中和抗体含量。
检验原理
采用间接法原理。
- 第一步,待检样本、样本稀释液与猪瘟病毒抗原包被的磁微粒混匀,待检样本中的猪瘟病毒抗体与磁微粒上的猪瘟病毒抗原结合。磁微粒通过磁铁吸附,清洗除去未结合物质。
- 第二步,加入碱性磷酸酶标记的羊抗猪IgG抗体,与磁珠上结合的猪瘟病毒抗体结合。磁微粒通过磁铁吸附,清洗除去未结合的酶标记抗体。
- 第三步,加入发光液,磁微粒上结合的碱性磷酸酶催化底物发光,通过光电倍增管测定发光强度,发光强度与待检样本中的猪瘟病毒抗体含量成正比。通过试剂盒内置的标准曲线,计算得出样本中的猪瘟病毒抗体含量。
试剂组成
由试剂盒R、定标品C、稀释液D组成。
- 试剂盒R:内含2个(200测试)或5个(500测试)独立的试剂盒。每个独立的试剂盒可做100个测试,包含以下组分:
抗原磁珠:3mL/100测试。主要成分为包被有CSFV 病毒蛋白的磁性微粒。
样本稀释液:21mL/100测试。主要成分为含牛血清白蛋白的缓冲液。
酶结合物:13mL/100测试。主要成分为碱性磷酸酶标记的羊抗猪IgG抗体。 - 定标品C:包含2个不同浓度的定标品C1、C2。每个浓度的定标品各有1瓶(200测试)或2瓶(500测试)。
定标品C1:1.0 mL/瓶。内含经灭活、稀释的CSFV Ab阴性血清,其抗体滴度为4。
定标品C2:1.0 mL/瓶。内含经灭活、稀释的CSFV Ab阳性血清,其抗体滴度为64。 - 稀释液D:主要成分为含牛血清白蛋白的缓冲液。
试验需要但并未随试剂盒提供的物料:
- 反应杯,货号:J002-500。
- 浓缩清洗液,货号:R001-100。
- 浓缩洗针液,货号:R002-100。
- 发光液,货号:W003-100。
储存条件及有效期
2~8℃下储存,切勿倒置。未开封,可稳定至标明的有效期截止日期。
- 试剂盒R开封后2~8℃下储存,可稳定28天;存放于仪器试剂仓内,可稳定28天。
- 定标品C开封后2~8℃下储存,可稳定28天;存放于仪器样本架上,可稳定8小时。
样本要求
新鲜、冷藏(2~8℃存放少于8天)、冷冻的血清或血浆都可用于检测。
待检样本应存放于1.5mL或2mL翻盖离心管中,体积应大于200μL。若样本中存在沉淀、粘稠等不溶物,应离心去除后再进行检测。避免出现泡沫。
检验方法
- 试剂配制
- 清洗液:用纯水将浓缩清洗液稀释25倍(1mL浓缩清洗液加24mL纯水),或将整瓶浓缩清洗液(100mL)稀释至2.5L。
- 洗针液:用纯水将浓缩洗针液稀释100倍(1mL浓缩洗针液加99mL纯水),或将整瓶浓缩洗针液(100mL)稀释至10L。
- 准备工作
- 阅读配套仪器说明书。将试剂盒R置于仪器试剂仓内。
- 确定清洗液桶、洗针液桶、发光液瓶中的相应试剂充足,反应杯仓中的反应杯充足,不足则补充;废液桶、垃圾箱空间足够;开机,进行日常检查。
- 检测
- 稀释样本:将血清或血浆样本用稀释液D做1:20稀释(10μL样本加入200μL稀释液)。
- 将稀释后的待测样本开盖,放入化学发光免疫分析仪标配的样本架中。
- 按仪器说明书操作,点击“样本”选项,选择项目种类,备注样本标识,开始检测。自动跳转至监控界面,32分钟后检测完成。
- 点击“结果”界面,查看检测结果。
定标
每一批试剂在首次使用时,应首先定标。另外,上次定标时间超过28天需重新定标。
注意事项
- 所有生物材料都应当做潜在的传染源对待。
- 处理样本和试剂时,佩戴防护手套,穿防护服。
参考值(参考范围)
猪瘟抗体滴度≥8判定为阳性,滴度<8判定为阴性。
性能参数
重复性
检测三份血清样本各10次,检测效价的变异系数(CV%)均没有超过5%。
序号 |
低值血清 |
中值血清 |
高值血清 |
1 |
5.60 |
33.98 |
91.43 |
2 |
5.33 |
34.24 |
88.30 |
3 |
5.74 |
35.79 |
85.98 |
4 |
5.60 |
33.28 |
88.40 |
5 |
5.37 |
33.32 |
85.68 |
6 |
5.27 |
34.54 |
89.16 |
7 |
5.41 |
35.06 |
88.94 |
8 |
5.23 |
35.08 |
86.58 |
9 |
5.76 |
34.36 |
87.85 |
10 |
5.61 |
34.72 |
92.00 |
CV% |
3.52% |
2.28% |
2.38% |
敏感性
本试剂盒功能灵敏度为滴度≤0.5。
方法学比较
- 符合率:检测800份猪血清样本,与目前市场上主流的ELISA试剂盒符合率94.75%。
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ELISA |
合计 |
|||
阴性 |
可疑 |
阳性 |
|||
化学发光法 |
阴性 |
369 |
13 |
8 |
390 |
阳性 |
7 |
14 |
389 |
410 |
|
合计 |
376 |
27 |
397 |
800 |
|
阴性符合率 |
98.13% |
||||
阳性符合率 |
97.98% |
||||
总符合率 |
94.75% |
- 相关性:以目前市场上主流的ELISA试剂盒测得阻断率、本产品测得效价(取对数)作图,两者相关性良好,相关系数r=0.9547。
生产企业
企业名称:上海鸣捷生物科技有限公司
地址:上海市闵行区莲花南路2899号5号楼218室
电话:021-34501596
网址:http://www.biotechmj.com