[禽病系列综述]禽白血病

禽白血病病毒综述

禽白血病是反转录病毒科反转录病毒的禽白血病病毒（Avian leukosis virus, ALV）引起的禽肿瘤性疾病的总称。ALV是一种有脂囊膜的RNA 病毒，引起禽各种造血细胞肿瘤性增生。根据病毒囊膜蛋白gp85的特性，可以将 ALV 分为 A、B、C、D、E 和 J 等共10 个亚群，不同的鸟类可能感染不同亚群的ALV，但自然感染鸡群的还只有A、B、C、D、E 和 J 6 个亚群。其中E 亚群几乎没有致病性。ALV 和有些病毒一样对外界环境的抵抗力较差，因此存活时间也比较短。ALV 的核心蛋白 (Gag) 包括基质蛋白 p19、p10、衣壳蛋白p27 和核衣壳蛋白 pl4，衣壳蛋白 p27 是最重要的群特异性抗原。

 

禽白血病病毒形态特征

ALV 为单股正链 RNA 病毒，属于反转录病毒科，C型反转录病毒属，病毒粒子近似球体，直径约为80-120nm,大致分为3层， 外层覆盖有放射状前突，构成病毒粒子的囊膜糖蛋白，中层是病毒的衣壳等，里层主要是由核衣壳、反转录酶、整合酶和二倍体RNA等组成，内部核芯电子密度致密，直径约为35-45nm，呈二十面体对称分布，内含有两条病毒链。

禽白血病病毒的理化性质

ALV表面含有大量的脂类，一般的去污剂及乙醚便可破坏病毒的结构，使病毒失去感染性。该病毒的半衰期短，对热不稳定，一般病毒储存在-60℃以下，才会长时间甚至几年保持病毒的感染力。一般病毒在PH 5-9的范围内稳定性较高。但是病毒对紫外线具有很强的抵抗力。

 

致病机理

ALV能够特异性感染宿主细胞，主要表现为病毒粒子首先以表面蛋白吸附到宿主细胞表面受体上，使病毒囊膜蛋白构象改变发生胞吞作用，在辅助受体或内体的帮助下病毒核心粒子侵入细胞内，完成脱衣壳。与其他亚群不同的是，ALV-J以宿主细胞上Na/H⁺离子交换泵为受体。进入宿主细胞后，细胞质中的病毒RNA在自身逆转录酶作用下反转录为线性双链cDNA，与整合酶等多种病毒蛋白以及部分宿主蛋白共同形成整合前复合体（pre-integrationcomplex, PIC）。随后，PIC进入细胞核内，在整合酶的作用下插入宿主基因组中形成前病毒，再经宿主细胞RNA聚合酶作用，转录形成新的RNA并合成各种结构蛋白，最终在细胞膜上完成组装并形成出芽，将子代病毒粒子释放，此时胞内一些多泡体也能与细胞膜融合，通过胞吐作用释放外泌体至胞外

 

流行病学

目前，禽白血病呈世界性分布。本病的传染源主要是病鸡、带毒鸡和被感染的种蛋。该病在禽类中鸡最易感。到目前为止，除了雉鸡、鹧鸪和鹌鹑外，ALV 在水禽（鸭和鹅）等其它禽类中的感染或发病的报道较罕见。ALV 通过垂直传播和水平传播方式传播疾病。在垂直感染中，后代鸡通常是通过母鸡的种蛋被感染，这种先天感染的鸡会产生免疫耐受，导致机体不能清除体内的病毒，而保持持续病毒血症，不产生抗体以及持续的向外排毒，最后很有可能发展为肿瘤。这些鸡群的胎粪病毒含量很高，成为水平传播的主要感染源。鸡群之间的相互接触，造成水平传播的速度很快。孵化后的鸡通过直接或间接与病毒接触，其感染病毒情况与病毒亚群有很大的关系。孵化后的鸡感染J亚群病毒，通常会保持持续的病毒血症不会产生抗体，而鸡感染其他亚群的病毒可能会因为机体的抵抗力而产生抗体。一般情况下，只有很少量的鸡禽白血病病毒感染后，会发生肿瘤性死亡，感染ALV的鸡一般会成为携带病毒且持续排毒的传染源。

 

检测方法

至今为止，人类还是对禽白血病的防治几乎无计可施，既没有疫苗可以利用，也没有有效的药物可以用于治疗，世界上各个国家控制禽白血病的主要方法就是通过病原检测，淘汰检测阳性的鸡，从而做到净化种群以达到消灭禽白血病的目的。因此，在禽白血病的防控中快速且准确的诊断就突显得至关重要。近几十年内，国内外相继建立了很多种禽白血病检测及诊断方法，但是每一种诊断检测技术均存在其固有的利弊，对禽白血病，一般都需要利用多种不同的检测技术的多次随机检测才能作出准确的结论。目前，ALV的检测方法主要有以下几种：

常规检测：常规的病毒分离与鉴定是检测病禽是否感染 ALV 的最有效方法。ALV 可从血液、胎粪、蛋清、精液等多种组织和器官中分离出来。这种方法虽然有效，但是需要细胞培养技术，普通实验室不具备相应的专业人员及设备。

血清学检测：血清学检测方法主要包括病毒中和试验(NT)、酶联免疫吸附试验 (ELISA)、胶体金免疫层析技术及琼脂扩散试验 (AGP) 等。ELISA方法是目前检测禽白血病病毒最常用的检测方法，操作简便，敏感性强，省时，不需要复杂的实验仪器，适合于大规模基层应用，在种群净化工作中运用广泛。

分子生物学检测：PCR和RT-PCR方法目前已广泛的应用于检测禽白血病病毒，PCR和RT-PCR方法耗时短，灵敏度强，可设计针对各亚群的特异性引物，从组织样品中直接检测病毒。

 

本公司将新一代的检测技术--磁微粒化学发光法应用于ALV检测，开发了检测蛋清中ALV P27蛋白含量的试剂盒，配合本公司自主研发的全自动化学发光免疫分析仪，实现了ALV自动化检测，避免了人为操作误差，降低了检测人员的技术水平要求和工作强度。相对于目前应用普遍的国外ELISA商品化试剂盒，大幅提高了敏感度，检测结果更加准确，检测过程更加快速，样本预处理更加便捷，而检测成本更低。本公司的ALV P27蛋白检测体系，致力于推动ALV检测的自动化、标准化，从而为ALV种群净化做出贡献。