预期用途

用于检测猪血清、血浆中的猪瘟病毒中和抗体。

概述

猪瘟是由猪瘟病毒（CSFV）引起的一种急性、发热、接触性传染病，具有高度传染性和致死性。本病在自然条件下只感染猪，不同年龄、性别、品种的猪和野猪都易感，一年四季均可发生；在我国大部分省都有发生，常给养猪业造成毁灭性损失。

预防猪瘟最有效的方法是接种猪瘟疫苗。猪瘟病毒抗体检测，可以反映疫苗免疫之后的抗体水平，有利于观察免疫效果，指导强化免疫时机。

本产品使用磁微粒包被猪瘟病毒1.1/2.1亚型病毒样颗粒，应用间接法原理，结合高灵敏度的化学发光技术，可有效检出猪血清、血浆中的猪瘟病毒1.1/2.1亚型中和抗体含量。

检验原理

采用间接法原理。

• 第一步，待检样本、样本稀释液与猪瘟病毒抗原包被的磁微粒混匀，待检样本中的猪瘟病毒抗体与磁微粒上的猪瘟病毒抗原结合。磁微粒通过磁铁吸附，清洗除去未结合物质。
• 第二步，加入碱性磷酸酶标记的羊抗猪IgG抗体，与磁珠上结合的猪瘟病毒抗体结合。磁微粒通过磁铁吸附，清洗除去未结合的酶标记抗体。
• 第三步，加入发光液，磁微粒上结合的碱性磷酸酶催化底物发光，通过光电倍增管测定发光强度，发光强度与待检样本中的猪瘟病毒抗体含量成正比。通过试剂盒内置的标准曲线，计算得出样本中的猪瘟病毒抗体含量。
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试剂组成

由试剂盒R、定标品C、稀释液D组成。

• 试剂盒R：内含2个（200测试）或5个（500测试）独立的试剂盒。每个独立的试剂盒可做100个测试，包含以下组分：
  抗原磁珠：3mL/100测试。主要成分为包被有CSFV 病毒蛋白的磁性微粒。
  样本稀释液：21mL/100测试。主要成分为含牛血清白蛋白的缓冲液。
  酶结合物：13mL/100测试。主要成分为碱性磷酸酶标记的羊抗猪IgG抗体。
• 定标品C：包含2个不同浓度的定标品C1、C2。每个浓度的定标品各有1瓶（200测试）或2瓶（500测试）。
  定标品C1：1.0 mL/瓶。内含经灭活、稀释的CSFV Ab阴性血清，其抗体滴度为4。
  定标品C2：1.0 mL/瓶。内含经灭活、稀释的CSFV Ab阳性血清，其抗体滴度为64。
• 稀释液D：主要成分为含牛血清白蛋白的缓冲液。

试验需要但并未随试剂盒提供的物料：

• 反应杯，货号：J002-500。
• 浓缩清洗液，货号：R001-100。
• 浓缩洗针液，货号：R002-100。
• 发光液，货号：W003-100。

储存条件及有效期

2~8℃下储存，切勿倒置。未开封，可稳定至标明的有效期截止日期。

• 试剂盒R开封后2~8℃下储存，可稳定28天；存放于仪器试剂仓内，可稳定28天。
• 定标品C开封后2~8℃下储存，可稳定28天；存放于仪器样本架上，可稳定8小时。

样本要求

新鲜、冷藏（2~8℃存放少于8天）、冷冻的血清或血浆都可用于检测。

待检样本应存放于1.5mL或2mL翻盖离心管中，体积应大于200μL。若样本中存在沉淀、粘稠等不溶物，应离心去除后再进行检测。避免出现泡沫。

检验方法

• 试剂配制
  1. 清洗液：用纯水将浓缩清洗液稀释25倍（1mL浓缩清洗液加24mL纯水），或将整瓶浓缩清洗液（100mL）稀释至2.5L。
  2. 洗针液：用纯水将浓缩洗针液稀释100倍（1mL浓缩洗针液加99mL纯水），或将整瓶浓缩洗针液（100mL）稀释至10L。
• 准备工作
  3. 阅读配套仪器说明书。将试剂盒R置于仪器试剂仓内。
  4. 确定清洗液桶、洗针液桶、发光液瓶中的相应试剂充足，反应杯仓中的反应杯充足，不足则补充；废液桶、垃圾箱空间足够；开机，进行日常检查。
• 检测
  5. 稀释样本：将血清或血浆样本用稀释液D做1:20稀释（10μL样本加入200μL稀释液）。
  6. 将稀释后的待测样本开盖，放入化学发光免疫分析仪标配的样本架中。
  7. 按仪器说明书操作，点击“样本”选项，选择项目种类，备注样本标识，开始检测。自动跳转至监控界面，32分钟后检测完成。
  8. 点击“结果”界面，查看检测结果。

定标

每一批试剂在首次使用时，应首先定标。另外，上次定标时间超过28天需重新定标。

注意事项

• 所有生物材料都应当做潜在的传染源对待。
• 处理样本和试剂时，佩戴防护手套，穿防护服。

参考值（参考范围）

猪瘟抗体滴度≥8判定为阳性，滴度<8判定为阴性。

性能参数

重复性

检测三份血清样本各10次，检测效价的变异系数（CV%）均没有超过5%。

敏感性

本试剂盒功能灵敏度为滴度≤0.5。

方法学比较

• 符合率：检测800份猪血清样本，与目前市场上主流的ELISA试剂盒符合率94.75%。

• 相关性：以目前市场上主流的ELISA试剂盒测得阻断率、本产品测得效价（取对数）作图，两者相关性良好，相关系数r=0.9547。

生产企业

企业名称：上海鸣捷生物科技有限公司

地址：上海市闵行区莲花南路2899号5号楼218室

电话：021-34501596

网址：http://www.biotechmj.com